双色受激发射损耗(STED)显微镜观测活细胞
2017-03-30 16:25:16   来源:   评论:0 点击:

传统荧光显微镜能够将活细胞实时成像在我们面前,这扩大了我们对细胞的认知。然而,荧光显微镜未能突破衍射障碍而无法进行结构小于200 nm的观测。受激发射损耗(STED)显微镜克服这一局限性,但是在研究细胞内部各
 传统荧光显微镜能够将活细胞实时成像在我们面前,这扩大了我们对细胞的认知。然而,荧光显微镜未能突破衍射障碍而无法进行结构小于200 nm的观测。受激发射损耗(STED)显微镜克服这一局限性,但是在研究细胞内部各部分动态的相互作用过程中,需要使用不同的颜色做标记,直到不久前,科研人员也只能使用单色观测蛋白质。

       耶鲁大学的研究者在New England Biolabs公司的帮助之下,成功开发出一种双色观测蛋白质的方法,这种方法使用专门的染料给蛋白质染色,证明是与实现双色STED显微镜兼容的。

       他们成功的关键是克服了STED显微镜的双色显示的挑战,成功在活细胞内加入染料并融合到蛋白内。活细胞内标记靶蛋白染色为双色,研究人员能够提高区分蛋白质和染料之间的目标,有效地缩小观测间隔。借助这种方法,研究人员获得分辨率为78 nm和82 nm的22个连续拍摄的,用两种颜色标记两个蛋白的相互作用的动态图像——活细胞内表皮蛋白生长因子和表皮蛋白生长因子受体。

       研究人员希望利用这种和其他新的方法,将STED活细胞观测显微镜的观测颜色扩展到三种或者更多的颜色,使三维成像成为可能。 

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